신종인플루엔자 확진검사법

Q1)다른 검사(나-469 바이러스항원검사) 등으로 신종인플루엔자A(H1N1) 확진이 가능한지? A1)보험급여과-3139호('09.8.17)에 의거 신종인플루엔자 A(H1N1)의 의심환자에 대한 Real time RT-PCR, Conventional RT-PCR, Multiplex RT-PCR 검사를 확진검사로 인정     어디에서 발취한 내용인지 ????가물가물.......퍼옴   Real time PCR이란 이름은 PCR과정 도중에 PCR의 산물이 생성되는 전 과정을 모니터링할 수 있다고 해서 붙여진 이름입니다.   PCR과 같은점은 PCR product가 만들어지는 원리 및 메카니즘이 거의 같다는 점이고   차이점은 PCR을 하기위해 tube안에 넣어주는 여러 요소에서 real time PCR은 몇 가지가 더 들어간다는 점이 다릅니다.   PCR에 필요한 요소들을 기본적으로 가지고 있으면서 Probe와 Labling material이 첨가됩니다.   PCR은 딱 필요한 DNA영역을 복제하기 위한 요소만 들어가는 반면에   real time PCR은 만들어진 product들을 가시화시켜 감지기가 감지해서 정확한 량을 측정할 수 있도록 해 주는 물질이 더 필요합니다.   PCR은 모든 반응이 완전히 끝난 후 최종적으로 만들어진 PCR product(DNA 조각들)을 전기영동의 과정을 거쳐 정량을 합니다.   Real time은 PCR 반응이 일어나는 과정을 감지, 측정하여, 원래 template로 집어넣은 DNA 량이 얼마였는지를 측정합니다.   넣어준 Template의 량이 얼마인지에 따라 PCR반응에 의해 생성된 product의 량을 실시간으로 측정하여 그린 그래프의 곡선이 좀더 빨리 시작되기도 하고 늦게 시작되기도 합니다.   PCR은 확실하게 존재하고 있는 DNA를 필요량 만큼 증폭하거나, 과정이 끝난 최종산물이 있는지 없는지를 가려 알고자 하는 DNA염기서열이 있는지 없는지를 알아내는 데 주로 사용되는 과정이라고 하면,   Real-time PCR은 찾는 염기서열의 존재유무 뿐만 아니라 얼마만큼 존재하고 있었는지까지 알아낼 수 있습니다.   게다가 PCR로 감지해 내기 어려운 소량의 template DNA에도 민감하게 반응하기 때문에 다양한 분야에 PCR보다 폭넓게 응용 및 이용되어지고 있습니다.   또 여러 종류의 Primer-probe set을 동시에 한 tube안에서 반응시켜 한번의 반응으로 여러 종류의 염기서열의 존재유무 및 존재량을 한번에 알아낼 수 있습니다.   Real-time의 원리는  한쌍의 primer가 붙는 지역 가운데에 형광물질을 붙여놓은 probe를 위치 시키면 양쪽 primer로 부터 점점 합성이 되어오던 가닥이 Probe를 밀어내게 되고, 이때 떨어져 나가던 Probe에 붙어 있는 형광물질이 특정 파장의 빛 또는 laser에 맞아 발광하게 되고 이 발광하는 빛을 센서가 감지하여 그 양을 측정하게 됩니다.  이렇게 PCR 한 사이클이 돌면 Laser를 tube에 쏘게 되고 이때 새로이 떨어져 나온 Probe에서 laser에 여기된 파장이 방출되고 이것을 센서가 잡아 몇 가닥이 반응에 쓰였는가를 측정하게 되고 이 값으로 생성된 DNA량을 계산합니다.   요즘은 주로 virus나 세균성 질병, 유전질환 등을 빠르게 진단하는데 많이 사용됩니다.